E.coli SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑

E.coli SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑是一種單鏈 DNA（ssDNA）結(jié)合蛋白，為E.coli DNA復(fù)制和修復(fù)所必需。SSB蛋白形成的四聚體特異性

的集合8~16個(gè)堿基，從而保護(hù)ssDNA免受核酸酶降解。體外實(shí)驗(yàn)表明，該蛋白能穩(wěn)定DNA的單鏈區(qū)域從而松弛DNA的雙鏈區(qū)

域，從而增強(qiáng)DNA聚合酶的活性。

組分

組分名稱500 μg

E.coli SSB Protein (2 μg/μl)250 μl

應(yīng)用

提高 DNA 聚合酶的延伸能力

增加 PCR 反應(yīng)的產(chǎn)量和特異性

增加 RT-PCR 中，反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量和延伸能力

改善強(qiáng)二級(jí)結(jié)構(gòu)區(qū)域的 DNA 測(cè)序

儲(chǔ)存

-20℃可保存3年。

使用注意事項(xiàng)

1. 該蛋白分子量為18.9kD。

2. 該蛋白保存液含50%甘油。

3. 該蛋白的最佳反應(yīng)溫度為37°C，65°C 20min可使該蛋白失活。

E.coli SSB單鏈結(jié)合蛋白試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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