RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)試劑

RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)試劑聚合酶，其來源于高保真DNA聚合酶，并加入了增強(qiáng)的延伸結(jié)構(gòu)，使其具有超保真性能（~280倍Taq）

、長片段擴(kuò)增能力、高產(chǎn)量。長片段擴(kuò)增能力，使用該酶可輕松擴(kuò)增8kb的基因組DNA、20kb的λDNA、8kb的cDNA。

該酶具有6kb/min以上的延伸速度。該酶具有5’-3’的聚合酶活性、強(qiáng)3’-5’的外切酶活性，產(chǎn)物為平末端。

主要特征

超保真擴(kuò)增：~280倍Taq的保真性能，是載體構(gòu)建、點突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。

快速擴(kuò)增：具有6kb/min的擴(kuò)增能力。

長片段擴(kuò)增：質(zhì)粒、λDNA 等簡單模板可以有效擴(kuò)增>20 kb，基因組可以有效擴(kuò)增>8 kb，cDNA可以有效擴(kuò)增>8kb。

組分

組分名稱500U

RAPA HiFi DNA Polymerase(5 U/μl)100 μl

2xRAPA HiFi Buffer1 ml×5

單位定義

一個活力單位即在在74°C條件下，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量。

儲存

長期儲存置于-20°C以下，可保存2年；短期使用置于4°C（3個月）保存。

RAPA HiFi DNA Polymerase(5U/ul)試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例2：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實例3： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

應(yīng)用實例1：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。